克隆形成实验步骤 CT升流实验具体步骤是什么？

CT升流实验具体步骤是什么？  

CT升流实验具体步骤是什么？

1、CT升流还主要是指伏安特性；

2、极性，在装置上都有标示，如果是P1进，P2出，相应的S1为极性端，S2为地端，如果P1出、P2进，那么相应的S2为极性端、S1为地端；

3、具体实验方法已经发你上面的邮箱。

在生物实验中PCR的具体步骤是什么？

类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。
PCR由变性--退火（复性）--延伸三个基本反应步骤构成：
1.模板DNA的变性：模板DNA经加热至90~95℃一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；
2.模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55~60℃，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；
3.引物的延伸：DNA模板--引物结合物在DNA聚合酶的作用下，于70~75℃，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复回圈变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次回圈的模板。
每完成一个回圈需2～4分钟，2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。

除磷剂小试实验具体步骤

试验准备
1、氧化沟出水水样：5L。
2、稀释20倍的除磷剂溶液：称取5g液体除磷剂于100ml容量瓶中，加水至刻线，摇匀。
3、稀释40倍的聚合氯化铝溶液：称取2.5g液体聚合氯化铝溶液（氧化铝含量为10%）于100ml容量瓶中，加水至刻线，摇匀。
4、稀释50倍的聚合氯化铝溶液：称取2.0g液体聚合氯化铝溶液（氧化铝含量为10%）于100 ml容量瓶中，加水至刻线，摇匀。
5、200ml烧杯、玻棒、移液管若干。
试验过程
1、用量筒准确量进水水样200ml于15个200ml烧杯中。将其按顺序编号。
2、用移液管分别移取稀释40倍的聚合氯化铝溶液0.32ml、0.48ml、0.64ml、0.80ml、0.96ml按顺序投加到编号为1#、4#、7#、10#、13#烧杯中（折算成含量10%聚铝溶液投加量依次为40 mg/L、60 mg/L、80 mg/L、100 mg/L、120 mg/L）；搅拌15S后，静置30min。
3、用移液管分别移取稀释50倍的聚合氯化铝溶液0.40ml、0.60ml、0.80ml、1.00ml、1.20ml按顺序投加到编号为2#、5#、8#、11#、14#烧杯中（折算成含量10%聚铝溶液投加量依次为40 mg/L、60 mg/L、80 mg/L、100 mg/L、120 mg/L）；搅拌15S后，静置30min。
4、用移液管分别移取稀释20倍的除磷剂溶液0.16ml、0.24ml、0.32ml、0.40ml、0.48ml按顺序投加到编号为3#、6#、9#、12#、15#烧杯中（折算成含量除磷剂原液投加量依次为40 mg/L、60 mg/L、80 mg/L、100 mg/L、120 mg/L）；搅拌15S后，静置30min。
5、检测上清液总磷含量。

western blot实验中加样的具体步骤？

阳性对照、阴性对照、你的样品。如果同时做两块胶，其中一块用来做染色的话，最好加上marker。
除了marker，其他的样都要加等量的上样缓冲液。

Na与O2加热的实验具体步骤

1.在试剂瓶中取出一块钠块，用刀片切一小块（绿豆大小）用滤纸吸干,放在石棉网上，在把石棉网放在带铁圈的铁架台上；
2.拿去酒精灯的盖子，用打火机点燃酒精灯，放在石棉网下面；
3.钠块迅速融化成钠球，并发出黄色火焰。

想做流式细胞分选实验,请教具体步骤

具体的步骤都是很繁琐的，而且每个实验都不尽相同。只能告诉你这些原则：
第一步就是设计，你的分选标记是什么，如果是表面抗体标记，标记后会不会诱导细胞启用，会不会影响下游的实验，这些都要弄明白。
第二步，选择你所要用仪器相容的荧光素。比如你们实验室的仪器没有紫外镭射，可是你选用了只有紫外荧光才能激发的荧光素。仪器就不能识别
第三步，准备单细胞悬液。这个也要根据你的实验材料，是培养的细胞，还是整块的组织，或者悬浮细胞，方法有不同。需要找到自己最优化的方法。原则就是最大限度的得到活细胞而且保持细胞处于非粘附状态。
第四部，染色。
第五部，分选。根据实验的要求，可以收集到管子里，或者96孔盘，每孔一个细胞。也是根据实验要求而定

实验室制备乙醇钠的具体步骤

称取一定量的钠,将其切碎,越碎越容易反应完全,
量取一定量的无水乙醇,(一般,无水乙醇的摩尔比要大于钠,虽然理论上是1比1的关系,要不反应不完全.)倒入钠中.
在通风橱中进行,因为是个放氢气的过程,还应避免火源.到后期反应较慢时应搅拌加速其反应,等钠全部反应完,乙醇钠为淡黄色澄清液体

转基因抗虫棉实验~~要具体步骤

一 转基因植株的获得
1.选取克隆良好的抗虫棉基因，并构建转基因载体；
2.将目的基因转入植物细胞
3.再生植株培养
4.再生植株移苗至盆栽
二 转基因植株分子检测
1.取再生植株叶片，进行基因组DNA提取
2.设计目的基因的检测引物，用基因组DNA作为模板进行PCR分子检测
3.运用RT-PCR选取过表达的转基因植株
4.好的转基因课题还需要southern，定量PCR，northern，western等分子检测实验
三 转基因植株的功能分析
1.对盆栽植株进行棉铃虫接种
2.对盆栽植株中植株的死亡，枯萎情况进行分析，并统计结果
3.收获期，获得T1代种子，将T1代种子种入大田，在保证安全的情况下，进行棉铃虫的接种，并分析大田内的抗虫情况
四 功能和遗传稳定的植株不断进行杂交，使得具有良好抗虫效果的转基因植株中的目的基因能稳定遗传，最好创造出品种，并进行注册。
然后，你就发达了。。。

击实试验的具体步骤

制备试件－－准备试验机－－保持所需的试验温度－－冲击试验－－读取结果－－出具试验报告。

爬片具体步骤是什么?

单位实验室做过，小编顺便推荐一下细胞爬片是从上海晶安生物公司买的，实验效果不错.
细胞免疫荧光步骤：
1.细胞爬片；首先是玻片的处理，普通的盖玻片用砂轮划成自己要的大小的小方块，先用洗衣粉洗干净，用水冲静烤乾，然后泡酸过夜，捞酸后流水洗净，烤乾，置于器皿中高压灭菌，然后再烤箱中大约8小时烤干备用。
爬片可以在培养皿 六孔板或24孔板中都可，我选择在培养皿中爬。一为节约经费（培养皿可以重复利用）二来觉得培养皿口大，操作比较方便。培养皿消毒同上，消毒时记得消两把镊子
具体操作是：用胰酶消化好细胞，充分吹打，使之成单细胞悬液（注意：这一点很重要，关系到将来爬出来片子的质量）
取出消毒的培养皿，可以先加少量培养基（以使玻片与培养皿紧密接触），将玻片小心放入摆放其中，然后将单细胞悬液一滴一滴的滴到玻片上。最后盖上培养皿置于37度5％CO2的暖箱中培养，根据细胞生长状况，24小时或更长时间适时取出爬片。
爬片置于37度PBS中洗三次，每次3到5秒钟，然后在4％多聚甲醛中固定15分钟，然后再用37度去离子水将甲醛冲干净，注意手法轻柔，要不然掉片很厉害。同时操作过程中注意玻片的正反面，要不然真的是前功尽弃。
将做好的爬片置于滤纸上晾乾，然后用中性树胶粘在载玻片上。注意一定要等中性树胶彻底干了之后才能做后续实验，要不然玻片会掉下来的，就又是前功尽弃了 做好的细胞爬片可以放在－20储存备用，具体能储存多长时间不太清楚，当然尽量早用。
2.4%多聚甲醛固定10min(固定细胞器用预冷的70%甲醇+30%丙酮)；
3.PBS漂洗5min；
4.0.5% Triton 穿孔15min(丙酮固定法不用透化处理)；
5.PBS漂洗2次，每次5min；
6.1%BSA封闭30min；
7.加入1%BSA稀释的一抗，于37℃杂交2h；
8.PBS漂洗2次，每次5min；
9.加入1%BSA稀释的二抗，于37℃杂交1h；
10.PBS漂洗2次，每次5min；
11.5ug/ml DAPI染色2min；
12.抗淬灭封片剂封片。
抗淬灭封片剂:
2.5% DABCO (w/v)
50mM Tris(pH8.0)
90%甘油